比较蛋白质组学在周围神经感觉束和运动束鉴别中作用的实验研究

作者:孟宪宇; 路来金; 陈焕新
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目的寻找周围神经感觉束和运动束之间的特异蛋白,为周围神经功能束的鉴定提供标记蛋白。方法在SunderlandV型损伤后8h和8d取Wistar大鼠股神经运动支和隐神经正常状态。从断裂端的远端分别切下5个mm样品。从6份样品中分离出18组蛋白质。纯化和定量后,用差分凝胶电泳技术(DIGE)荧光标记蛋白质,进行凝胶图像扫描,用图像分析软件(DeCyder)比较、分析和鉴定各组间差异表达的蛋白质图谱,选择表达差异大于1.5倍的蛋白点,准备凝胶切割、酶消化和点靶,分析和识别MALDI-TOF-Pro质谱仪的PMF地图,并通过Rt-PCR技术分析验证蛋白质组学研究的结果。结果共鉴定出6个蛋白点,包括膜联蛋白V、NF-L、Tec、Serpina3n、PRDX-2和TPM-1。股神经运动支/隐神经的膜联蛋白V比值为-1.94倍,吻合良好,蛋白在所有凝胶中均稳定出现,P(0.00068)<0.05,具有统计学意义。SunderlandV型损伤后8小时股神经运动支与隐神经的比率为-2.07倍,匹配良好,蛋白质在所有凝胶中稳定出现,P(0.0053)<0.05;SunderlandV型损伤后8小时股神经运动支与隐神经的比率为-2.20倍,匹配良好,蛋白质在所有凝胶中稳定出现,P(0.0069)<0.05,这具有统计学意义。结论周围神经感觉束和运动束中膜联蛋白V的表达存在显著差异。膜联蛋白V可作为区分周围神经感觉束和运动束的高分化标记蛋白。