bta-miR－377与下丘脑分泌的可卡因苯丙胺调节转录肽（CART）有关。为了分析bta-miR－377在牛下丘脑中的表达，为后续研究bta-miR－377与CART的相互作用及其影响牛卵泡发育的机制奠定基础，采用Trizol法提取牛下丘脑总蛋白，并用茎环结构法设计特异性引物，采用半定量RT－PCR技术克隆人btamiR－377（bta-miR－377）在不同条件下观察琼脂糖凝胶电泳战争后Marker和目标带的分离情况。凝胶浓度分别为2.0%和2.5%。电压分别为100伏和80伏，时间分别为40、60和80min。同时，利用Katar软件对灰度值不同条件下获得的bta-miR－377条带进行了分析，结合电泳结果，确定了最佳分离条件。结果表明，茎环结构法的使用可以达到延长bta-miR－377脉片段的目的，具有很强的特异性。当凝胶浓度为2.5%、电压为80 V、时间为80 min时，bta-miR－377条带分离效果好，表达量高。在此条件下，该条带的灰度值与其他组有显著差异，这与电泳分析结果一致，表明低浓度凝胶的分辨率较低。长期高压将导致DNA的退化和谱带的分散。然而，在适当的电压下，电泳时间过短会使DNA分子无法聚集，谱带过宽。这表明合适的电泳条件是鉴定miRNA蛋白表达的关键。综上所述，btamiR－377脉在牛下丘脑中表达，丰富了动物生殖生理学中下丘脑-垂体-性腺轴的内分泌调节理论。