目的基于网络药理学和体外实验，探讨复方苦参注射液（CKI）对抗非小细胞肺癌（NSCLC）的分子机制。方法通过网络公共数据库和文献综述获取CKI和NSCLC的目标。在筛选了它们的共同靶点后，构建了靶蛋白相互作用网络，找到了CKI对抗NSCLC的关键靶点。GO和KEGG利用David数据库对关键目标进行了信号通路分析，结果通过R软件可视化。qPCR技术在体外验证了富集到NSCLC的信号通路。结果共收集到372个CKI相关目标和426个NSCLC相关目标。生物信息学分析了93个生物过程（BP）和30个信号通路，其中缺氧诱导因子1号（HIF-1）信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（AMPK）信号通路和磷脂酰肌醇3’-激酶（PI3K－Akt）信号通路可能与CKI对NSCLC的抗性有关。体外实验表明，ERBB2、夏洛克·MTOR、IGF1R和VEGFA经CKI处理后的基因显著低于表达量。结论CKI可能通过抑制ERBB2、夏洛克·MTOR、IGF1R和VEGFA基因的相对表达，调节HIF-1、AMPK和PI3K－Akt信号通路发挥抗NSCLC作用。