健脾消癌方通过PI3K/Akt信号通路抑制结肠癌血管生成的研究

作者:王容容; 王其美; 田雪飞; 柏正平; 蒋益兰
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目的观察培养液对HUVEC细胞腔形成的影响,并从PI3K/Akt生物轴调控的角度探讨其机制。方法体外培养HCT116细胞细胞,分为对照组、健脾消艾方(加15%健脾消艾方含血清)组和人参皂苷Rg3组组。HCT116细胞健脾消癌方条件培养液进行了准备(分组和准备方法见实验方法),条件培养液用于干预HUVEC(脐静脉内皮细胞,人类脐静脉内皮细胞),Matrigel基质胶方法用于检测HCT116细胞健脾消癌方条件培养液对HUVEC小管形成的影响。然后,免疫印迹法(Western blot)检测了PI3K、Akt、p-Akt和血管内皮生长因子的蛋白表达。最后,在实验中验证了健脾消艾方对肿瘤生长速度的影响。用VEGF蛋白表达和免疫组织化学染色检测肿瘤中的血管生成。结果模型组HUVEC细胞腔形成明显高于空白血清组(P<0.05),健脾消艾方组和人参皂苷Rg3组组HUVEC细胞腔形成明显低于模型组(P<0.01)。模型组p-Akt和VEGF蛋白的表达水平高于空白血清组(p<0.05),健脾消艾方组和人参皂苷Rg3组的表达水平显著低于模型组(p<0.01)。PI3K组和Akt蛋白表达量组之间没有显著差异。与对照组相比,模型组荷瘤小鼠肿瘤体积显著增加,肿瘤组织中VEGF表达和CD31阳性面积显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,健脾消艾方组和人参皂苷Rg3组荷瘤小鼠组肿瘤体积明显缩小,肿瘤组织中VEGF表达和CD31阳性面积明显减少(P<0.05)。结论健脾消艾方能抑制肿瘤的生长发育,其机制可能与PI3K/Akt生物轴调节VEGF表达有关。